В зависимости от использования культуральную среду можно разделить на основную культуральную среду, питательную культуральную среду, обогащенную культуральную среду, селективную культуральную среду, идентификационную культуральную среду, анаэробную культуральную среду и т. д.

1. Основная среда – это питательная основа, обычно необходимая большинству микроорганизмов. Если у микроорганизма есть особые потребности, он может добавить некоторые ингредиенты на этой основе, такие как пептонная вода, бульонная культуральная среда, питательный агар и т. д. 1% пептонная водная среда является самой простой базовой средой. Эта основная среда может быть использована для общего бактериального обогащения культуры и теста на индиго-субстрат. Если добавляются индикаторы и сахара, они будут подготовлены в среду для ферментации сахара для теста на ферментацию сахара и станут средой для идентификации; Если увеличить дозировку хлорида натрия в 1%-ной пептонной воде и повысить рН примерно до 8,6, она станет щелочной пептонной водой для накопительной культуры Vibrio cholerae и станет специальной питательной средой.

2. Питательная среда добавляет некоторые специальные питательные вещества, такие как глюкоза, кровь, сыворотка, дрожжевой экстракт, факторы роста и т. д., к основной питательной среде, чтобы в ней могли расти бактерии с высокой потребностью в питательных веществах. Streptococcus pneumoniae и др. должны расти в среде, содержащей кровь или сыворотку; В питательную среду микобактерий туберкулеза необходимо добавлять яйца, картофель, глицерин и т.п. Наиболее часто используемой питательной средой является пластинка с кровяным агаром.

3. Среда для обогащения обычно представляет собой жидкую среду, которая используется для обогащения культур бактерий. Его можно использовать широко или специально. Специальные питательные среды часто содержат специальные питательные вещества или факторы роста, необходимые для роста целевых бактерий.

4. Селективные среды: селективные среды содержат питательные вещества (бактерициды) и бактериостатические агенты (селекторы). После посева образца в такие среды нецелевые бактерии ингибируются в разной степени за счет селективного ингибирования бактериостатическими агентами, что в большей степени способствует пролиферации или отделению целевых бактерий. Уровень положительного обнаружения целевых бактерий можно повысить, используя селективную среду в течение определенного периода времени, а затем инокулируя ее в среду для селективной идентификации. Существует множество видов бактериостатических агентов, таких как малахитовый зеленый, бриллиантовый зеленый, селенит натрия, дезоксихолат натрия, желчная соль, тетрасульфидсульфонат натрия и различные антибиотики. Количество добавляемого бактериостатического агента должно быть соответствующим и точным. Некоторые из них очень токсичны, а некоторые не устойчивы к высокой температуре. Подготовке следует уделить особое внимание.

5. Дифференциальная среда представляет собой реакционный субстрат и индикатор, добавляемый в культуральную среду для различения характеристик определенных микроорганизмов и их идентификации. Его можно разделить на среду общей идентификации и среду селективной идентификации. Среда, которая используется только для различения различных видов микробов, называется средой для общей идентификации. Как правило, этот тип среды не добавляет бактериостатических агентов, а содержит только индикаторы, такие как среда Киршнера с бисахаридным железом, которая содержит глюкозу и лактозу. Феноловый красный используется в качестве индикатора для наблюдения за изменением цвета культурального субстрата и наклонной поверхности для определения способности бактерий к ферментации до глюкозы и лактозы. Добавить цитрат трехвалентного аммония, после культивирования, наблюдать, есть ли черные отложения, чтобы определить, разлагают ли бактерии серосодержащие аминокислоты в пептоне с образованием сероводорода; Другим примером является агар с эозин-метиленовым синим, который содержит лактозу (субстрат для реакции) и эозин-метиленовый синий (индикатор) для выявления кишечной палочки, кишечных патогенных бактерий и других разнообразных бактерий. Общая идентификационная среда характеризуется наличием в формуле индикаторов и может быть использована для различения разных видов микроорганизмов. Некоторые среды для идентификации могут также использоваться в качестве специальных сред для выделения и культивирования определенных бактерий, таких как триптонно-соевый агар и кровяной агар шоколадного цвета. который содержит лактозу (субстрат реакции) и эозин метиленовый синий (индикатор) для идентификации Escherichia coli, кишечных патогенных бактерий и других разнообразных бактерий. Общая идентификационная среда характеризуется наличием в формуле индикаторов и может быть использована для различения разных видов микроорганизмов. Некоторые среды для идентификации могут также использоваться в качестве специальных сред для выделения и культивирования определенных бактерий, таких как триптонно-соевый агар и кровяной агар шоколадного цвета. который содержит лактозу (субстрат реакции) и эозин метиленовый синий (индикатор) для идентификации Escherichia coli, кишечных патогенных бактерий и других разнообразных бактерий. Общая идентификационная среда характеризуется наличием в формуле индикаторов и может быть использована для различения разных видов микроорганизмов. Некоторые среды для идентификации могут также использоваться в качестве специальных сред для выделения и культивирования определенных бактерий, таких как триптонно-соевый агар и кровяной агар шоколадного цвета.

В культуральную среду добавляют некоторые ингибиторы и индикаторы, чтобы подавить рост некоторых бактерий, способствовать размножению бактерий-мишеней и придать растущим бактериальным колониям определенные характеристики для облегчения идентификации и отбора. Этот вид культуральной среды называется селективной идентификационной средой. Например, агар SS содержит лактозу (реакционный субстрат), нейтральный красный, цитрат трехвалентного железа (индикатор), бриллиантовый зеленый и желчную соль (бактериостатический агент). Бактериостатические агенты, такие как бриллиантовый зеленый и желчная соль, могут ингибировать рост грамположительных бактерий и некоторых кишечных палочек, но не действуют на сальмонеллы и шигеллы. Кроме того, кишечная палочка может сбраживать лактозу с образованием кислоты, что делает колонии красными. сальмонеллы и шигеллы не ферментируют лактозу, и их колонии бесцветны. Если бактерии производят сероводород, они будут реагировать с цитратом аммония железа с образованием осадка сульфида железа, а центр колонии будет черным или коричневым. Для достижения цели идентификации.

В последние годы в стране и за рубежом были разработаны специальные цветные среды для проявления некоторых бактерий с использованием специфических ферментов некоторых бактерий и подбором соответствующих субстратов. Он использовался для выделения и идентификации бактерий и дал хорошие результаты. Эта среда для проявления цвета фактически также является средой для идентификации. Основной принцип заключается в добавлении комбинации хромогена (или флуорогена) и субстрата бактериального действия в культуральную среду, и когда бактерии содержат соответствующие ферменты, комбинация будет разлагаться с образованием цвета (или проявлением флуоресценции). Например, конъюгат хромогенгликозида разлагается под действием гликозидазы с отделением гликозида от хромогена и проявлением окраски; Флуоресцентные конъюгаты аминокислот (без флуоресценции) проявляют флуоресценцию, отделяя аминокислоты от флуоресцирующих веществ под действием аминопептидазы. Обычными хромогенами для развития окраски являются: α-нафтол, β-нафтол, о-нитрофенол, п-нитрофенол, п-нитроанилин, фенолфталеин, 2-амино, 4-нитробензол и др.; Обычно используемые флуорофоры включают 4-метилумбеллиферон (также известный как 7-гидрокси-4-метилкумарин) и так далее. В настоящее время среда для проявления окраски используется для выделения, идентификации и культивирования различных бактерий или грибков, таких как Salmonella, Escherichia coli, Listeria, Bifidobacterium, Lactobacillus, Candida albicans и других сред для проявления окраски. α-нафтол, β-нафтол, о-нитрофенол, п-нитрофенол, п-нитроанилин, фенолфталеин, 2-амино, 4-нитробензол и др.; Обычно используемые флуорофоры включают 4-метилумбеллиферон (также известный как 7-гидрокси-4-метилкумарин) и так далее. В настоящее время среда для проявления окраски используется для выделения, идентификации и культивирования различных бактерий или грибков, таких как Salmonella, Escherichia coli, Listeria, Bifidobacterium, Lactobacillus, Candida albicans и других сред для проявления окраски. α-нафтол, β-нафтол, о-нитрофенол, п-нитрофенол, п-нитроанилин, фенолфталеин, 2-амино, 4-нитробензол и др.; Обычно используемые флуорофоры включают 4-метилумбеллиферон (также известный как 7-гидрокси-4-метилкумарин) и так далее. В настоящее время среда для проявления окраски используется для выделения, идентификации и культивирования различных бактерий или грибков, таких как Salmonella, Escherichia coli, Listeria, Bifidobacterium, Lactobacillus, Candida albicans и других сред для проявления окраски.

Существуют также некоторые среды идентификации, которые используют различные системы ферментов, уникальные для бактерий, для разложения и использования различных специфических сахаров, спиртов, аминокислот или других субстратов для получения кислот, газов, щелочей или других видимых веществ, чтобы идентифицировать бактерии, такие как обычно используемые биохимические среды.

Культуральную среду, используемую для определения биохимических характеристик бактерий, характеризуют добавлением специфического субстрата к основной культуральной среде, не содержащей сахара, и добавлением индикатора. Ряд результатов биохимических реакций бактерий в такой питательной среде окончательно отображается через индикатор. Этот вид среды является средой идентификации биохимических реакций. В зависимости от дозировки его можно разделить на основную биохимическую среду и малую биохимическую среду. Стоит отметить, что на некоторые компоненты биохимической тест-среды влияет множество факторов, таких как высокая температура и рН. при подготовке и использовании его следует строго контролировать в соответствии с реальной ситуацией, чтобы предотвратить повреждение эффективных компонентов, чтобы обеспечить эффект его использования.

6. Анаэробная среда – это среда для выделения, культивирования и идентификации анаэробных бактерий, которая называется анаэробной средой. Из-за отсутствия различных ферментов, необходимых для аэробного метаболизма, таких как цитохром и цитохромоксидаза, каталаза и пероксидаза, а также супероксиддисмутаза, анаэробы не могут осуществлять аэробный метаболизм из-за собственных метаболических дефектов, и энергия, образующаяся при анаэробном брожении, снижается. недостаточный. Следовательно, анаэробы не могут расти и выживать в нормальной атмосферной среде. Чтобы анаэробные бактерии могли нормально расти, необходимо приготовить специальную среду с высоким содержанием питательных веществ, низким окислительно-восстановительным потенциалом и особыми факторами роста.

Анаэробную культуральную среду обычно готовят из экстрактов сердца, мозга или других органов, и часто необходимо добавлять тиогликолят натрия, цистеин, мясной остаток, восстановленное железо, активированный уголь и другие восстановители или раскисляющие вещества. Чтобы наблюдать за содержанием кислорода в культуральной среде, в жидкую культуральную среду также можно добавить азурол или метиленовый синий в качестве окислительно-восстановительного индикатора. Сердце, экстракт мозга, печеночная масса и остатки мяса содержат ненасыщенные жирные кислоты, способные поглощать кислород в культуральной среде. Тиогликолят натрия и цистеин являются сильными восстановителями, которые могут поглощать кислород, растворенный в культуральной среде. Сухой активированный уголь и гигроскопическая вата также могут поглощать кислород культуральной среды. Следовательно, целью добавления восстановителя и абсорбирующего материала в культуральную среду является создание бескислородной среды культуральной среды и поддержание низкого окислительно-восстановительного потенциала. Кроме того, на поверхность культуральной среды можно нанести слой жидкого парафина, чтобы изолировать контакт между культуральной средой и атмосферой.

7. Жидкость культуры клеток (LCL) относится к жидкости, используемой для культивирования, сохранения и транспортировки живых тканей, органов и клеток in vitro для различных целей. По сути, это питательная среда, искусственно имитирующая рост в естественных условиях, чтобы клетки могли расти и размножаться в этой среде. Благодаря тому, что количество его компонентов четкое и с его помощью можно наблюдать различные биологические изменения изучаемого объекта, регулируя определенный компонент, он широко используется в исследованиях клеточной биологии. Компоненты раствора для культивирования клеток в основном включают воду, аминокислоты, витамины, углеводы, неорганические ионы, факторы роста и т. д. Эти компоненты должны быть строго отобраны и протестированы перед их использованием. Используемая вода должна соответствовать требованиям испытательной воды класса 2 (CB/T 6682-1992).