1. Ультрачистый верстак

В настоящее время подавляющее большинство клеточных лабораторий используют сверхчистые рабочие столы для достижения асептической работы, с простой операцией, удобной установкой, небольшим занимаемым пространством и хорошим эффектом очистки. Anhui Renhe Purification представляет два основных типа сверхчистых рабочих столов — с боковым потоком (вертикальный тип) и тип с оттоком (горизонтальный ламинарный тип потока). Принцип работы обычно заключается в том, что воздух в помещении сначала фильтруется фильтром грубой очистки, вдавливается в коробку статического давления центробежным вентилятором, а затем тонко фильтруется высокоэффективным воздушным фильтром. Образовавшийся поток чистого воздуха проходит через стерильную зону с определенной равномерной секционной скоростью ветра, формируя таким образом беспыльную и стерильную рабочую среду с высокой степенью чистоты.

(1) Рабочий стол с боковым потоком: воздушный поток после очистки воздуха течет слева или справа на противоположную сторону через рабочий стол, либо сверху вниз, либо снизу вверх, образуя барьер для воздушного потока, чтобы поддерживать стерильность рабочей зоны. Структура рабочего стола закрыта;

(2) Рабочий стол с отводом: очищенный воздух направляется к оператору, поэтому поток постороннего воздуха не будет смешиваться с работой. Конструкция рабочего стола открытая, но опыт работы с вредными веществами неблагоприятен для оператора. Сверхчистый рабочий стол должен регулярно проверяться соответствующими отделами на чистоту. Чистота сверхчистого рабочего стола, отвечающего требованиям, должна достигать 100 баллов, а размер частиц должен проверяться счетчиком частиц пыли ≤ 5 мкм. Количество частиц пыли в м не должно превышать 3,5/л; Расход воздуха должен регулироваться в пределах 0,75-1,0 м3/с; Среднее количество бактериальных колоний составляет менее 1, при необходимости фильтр необходимо заменить в соответствии со стерильностью.

2. Микроскоп

Инвертированный микроскоп является необходимым оборудованием для повседневной работы лаборатории клеточных культур, которое в основном используется для ежедневного понимания роста клеток и наблюдения за загрязнением. Если позволяют средства, рекомендуется использовать качественный фазово-контрастный микроскоп, анатомический микроскоп, люминесцентный микроскоп, систему видеозаписи или аппарат для покадровой киносъемки, оснащенный фотосистемой, для фотографирования и регистрации роста клеток в любое время.

3. Инкубатор

Как и клетки in vivo, клетки, культивируемые in vitro, должны выживать при постоянной температуре. Как правило, оптимальная температура роста составляет 37 ℃, а разница температур не должна превышать ± 0,5 ℃. Когда температура повышается на 2 ℃, она становится неблагоприятной для выживания клеток, и клетки вскоре погибают, когда температура превышает 40 ℃. Таким образом, термостатический инкубатор и инкубатор CO2, которые могут точно контролировать температуру, являются лучшим выбором.

(1) Инкубатор с постоянной температурой: должен быть выбран водонепроницаемый или транзисторный инкубатор с автоматическим контролем температуры, который имеет высокую чувствительность и стабильный контроль температуры. Обычный термостатический инкубатор дешевле, но его недостаток в том, что он подходит только для закрытого выращивания.

(2) CO2-инкубатор: в настоящее время широко используются большинство помещений для культивирования клеток. Преимущество инкубатора CO2 заключается в том, что он может обеспечить определенное количество CO2 (обычная концентрация составляет 5%), необходимое для культивирования клеток, и легко стабилизировать pH культуральной среды, что подходит для открытого или полуоткрытого культура. При использовании культурального флакона, чтобы внутренняя часть культурального флакона вентилировалась внешним миром, крышку флакона можно слегка ослабить. Во избежание загрязнения клеток при использовании этого метода культивирования воздух в культуральном боксе должен содержаться в чистоте, и его необходимо регулярно дезинфицировать ультрафиолетовым излучением или спиртом. В то же время резервуар со стерильной дистиллированной водой должен быть помещен в культуральный бокс, чтобы предотвратить испарение культурального раствора.

(3) Расходные материалы для культивирования клеток: для культивирования клеток можно использовать чашки для культивирования, планшеты или бутылки.

4. Духовка (сушильная печь)

Некоторые инструменты и сосуды, используемые для культивирования клеток, должны быть высушены перед использованием, а стеклянная посуда должна быть стерилизована сухим жаром. Во время дезинфекции сухим жаром температура в печи обычно должна достигать более 160 ℃, и обычно используется печь с воздушным дутьем. Его преимуществами являются равномерная температура и хороший эффект, а недостатками является медленный процесс нагрева. При нагреве не допускается разогрев перед продувкой, но продувка и нагрев должны начинаться одновременно. Когда температура достигает 100 ℃, продувку следует прекратить. Следует соблюдать осторожность, чтобы не сжечь бумагу или вату, которыми обернута посуда. Сгоревшие остатки могут повлиять на рост клеток. После дезинфекции дверь бокса нельзя открывать сразу, чтобы не разбить стеклянную посуду из-за резкого охлаждения.

5. Устройство очистки воды

Качество воды для культивирования клеток высокое. Вода для приготовления клеточных культур, жидкость, связанная с клеточными культурами, и вода для мытья посуды для клеточных культур должны быть заранее строго очищены. В настоящее время существует множество методов очистки, объединенных для того, чтобы сделать использование устройств чистой воды, которые могут очищать обычную воду в чистую воду и сверхчистую воду, очень гибким и удобным. Они могут быть настенными, настольными, оснащены резервуарами для хранения воды или использоваться непосредственно с пистолетом для разделения жидкостей. Они также могут быть оснащены функциями стерилизации в соответствии с требованиями к различным типам экспериментальной воды, эффективно удаляя ферменты ДНК, ферменты РНК, протеазы и т. д., а также устройствами ультрафильтрации чистой воды, которые могут эффективно удалять источники тепла и эндотоксины.

6. Холодильник

Необходимое оборудование лаборатории клеточных культур должно быть выделено, в нем не должно храниться летучих, легковоспламеняющихся и других вредных для клеток веществ, и оно должно содержаться в чистоте. Как правило, это обычные холодильники, низкотемпературные холодильники и сверхнизкотемпературные холодильники.

Обычный холодильник: он может хранить культуральную жидкость, физиологический раствор, жидкий реагент Хэнкса и другие предметы культуры, а также может хранить образцы тканей в течение короткого времени.

Холодильник с низкой температурой -20 ℃ и холодильник со сверхнизкой температурой: используется для хранения препаратов, которые необходимо заморозить для поддержания биологической активности и которые необходимо хранить в течение длительного времени, таких как ферменты, сыворотка и т. д.

7. Клеточный криостат

Контейнеры с жидким азотом, обычно используемые в резервуаре, можно разделить на различные типы и спецификации в зависимости от потребностей использования. При выборе контейнера с жидким азотом необходимо учитывать три фактора: размер объема, легкий доступ и использование, а также улетучивание жидкого азота. Размер контейнера с жидким азотом обычно составляет 25-500 л, в нем можно хранить около 250-15000 криопробирок объемом 1 мл. Самая низкая температура жидкого азота может достигать - 196 ℃, поэтому будьте осторожны, чтобы избежать обморожения при использовании. Поскольку жидкий азот является летучим, необходимо следить за количеством оставшегося жидкого азота и вовремя дополнять его, чтобы избежать повреждения или гибели клеток из-за недостатка жидкого азота. В настоящее время существует множество интеллектуальных контейнеров для криоконсервации клеток. Контейнеры с жидким азотом, оснащенные электронными контроллерами, могут осуществлять автоматическую криоконсервацию; Уровень жидкого азота и температуру образца можно контролировать, чтобы гарантировать, что температура образца всегда находится на заданном уровне температуры; Система сигнализации может быть настроена на сигнализацию в случае уровня жидкого азота, температуры, батареи, напряжения, источника питания и других отклонений; В то же время предусмотрена система перепуска горячего газа для предотвращения попадания теплого воздуха выше -130 ℃ в резервуар с жидким азотом, чтобы более эффективно защитить образец и предотвратить повышение температуры в контейнере. Кроме того, можно выбрать резервуар для подачи жидкого азота для добавления жидкого азота в резервуар для хранения через соединительную трубу, чтобы обеспечить безопасность образца. Уровень жидкого азота и температуру образца можно контролировать, чтобы гарантировать, что температура образца всегда находится на заданном уровне температуры; Система сигнализации может быть настроена на сигнализацию в случае уровня жидкого азота, температуры, батареи, напряжения, источника питания и других отклонений; В то же время предусмотрена система перепуска горячего газа для предотвращения попадания теплого воздуха выше -130 ℃ в резервуар с жидким азотом, чтобы более эффективно защитить образец и предотвратить повышение температуры в контейнере. Кроме того, можно выбрать резервуар для подачи жидкого азота для добавления жидкого азота в резервуар для хранения через соединительную трубу, чтобы обеспечить безопасность образца. Уровень жидкого азота и температуру образца можно контролировать, чтобы гарантировать, что температура образца всегда находится на заданном уровне температуры; Система сигнализации может быть настроена на сигнализацию в случае уровня жидкого азота, температуры, батареи, напряжения, источника питания и других отклонений; В то же время предусмотрена система перепуска горячего газа для предотвращения попадания теплого воздуха выше -130 ℃ в резервуар с жидким азотом, чтобы более эффективно защитить образец и предотвратить повышение температуры в контейнере. Кроме того, можно выбрать резервуар для подачи жидкого азота для добавления жидкого азота в резервуар для хранения через соединительную трубу, чтобы обеспечить безопасность образца. Система сигнализации может быть настроена на сигнализацию в случае уровня жидкого азота, температуры, батареи, напряжения, источника питания и других отклонений; В то же время предусмотрена система перепуска горячего газа для предотвращения попадания теплого воздуха выше -130 ℃ в резервуар с жидким азотом, чтобы более эффективно защитить образец и предотвратить повышение температуры в контейнере. Кроме того, можно выбрать резервуар для подачи жидкого азота для добавления жидкого азота в резервуар для хранения через соединительную трубу, чтобы обеспечить безопасность образца. Система сигнализации может быть настроена на сигнализацию в случае уровня жидкого азота, температуры, батареи, напряжения, источника питания и других отклонений; В то же время предусмотрена система перепуска горячего газа для предотвращения попадания теплого воздуха выше -130 ℃ в резервуар с жидким азотом, чтобы более эффективно защитить образец и предотвратить повышение температуры в контейнере. Кроме того, можно выбрать резервуар для подачи жидкого азота для добавления жидкого азота в резервуар для хранения через соединительную трубу, чтобы обеспечить безопасность образца.

8. Центрифуга

В культуре клеток центрифугирование обычно используется для приготовления клеточной суспензии, регулирования плотности клеток, промывки и сбора клеток. Настольная центрифуга на 4000 об/мин обычно конфигурируется; Для осаждения клеток требуется центробежная сила 80-100G, поскольку чрезмерная центробежная сила повреждает клетки. В соответствии с различными требованиями на выбор предлагаются центрифуги большой емкости с регулируемой температурой, высокоскоростные центрифуги, низкотемпературные замораживающие центрифуги и другие более функциональные центрифуги.

9. Баланс

Обычно используются прецизионные весы и аналитические весы. Точность аналитических весов обычно составляет 0,1 мг, 0,01 мг и 0,001 мг. Как правило, подходящие весы выбирают в соответствии с объемом пробы и требованиями к точности: весы с точностью 0,1 мг следует выбирать, когда объем пробы превышает 100 мг; Количество пробы составляет 100-10 мг, и выбирается баланс с точностью 0,01 мг; Весы с точностью 0,001 мг следует выбирать для объема пробы 10 мг. Баланс необходимо регулярно калибровать. Весы с функцией автоматической калибровки могут быть выбраны для удобства обслуживания. При использовании весов обращайте внимание на чистоту и избегайте прямого контакта коррозионно-активного порошка и жидкости с платформой для взвешивания.