Культура клеток животных и ее технологическое развитие в производстве вирусных вакцин
Вакцина представляет собой автоматический иммунный агент для предотвращения инфекционных заболеваний, который производится из патогенных микроорганизмов (таких как бактерии, вирусы и т. д.) и их метаболитов путем искусственной редукции вируса, инактивации или генной инженерии. В зависимости от различных типов возбудителей инфекционных заболеваний, которые он предотвращает, его можно условно разделить на бактериальные вакцины и вирусные вакцины. Многие вирусные вакцины, используемые в популяции, в настоящее время необходимо получать в процессе культивирования, очистки, концентрирования, инактивации или лизиса вируса. Поскольку виросомы являются своего рода паразитическими микроорганизмами, специализирующимися на клетках-хозяевах, их размножение должно осуществляться в их специфических клетках-хозяевах. Следовательно,
1 общий процесс культивирования клеток животных
Культура клеток животных относится к культивированию популяций живых клеток животных in vitro. В настоящее время многие области биотехнологии будут использовать эту технологию. Особенно в области медицины клеточная культура имеет особую роль и ценность. Например, многие вакцины или генно-инженерные препараты получают путем культивирования клеток в процессе исследований и производства. Обычно используемые инструменты и оборудование для культивирования клеток животных включают асептическую комнату, сверхчистое рабочее место, низкотемпературный холодильник, рН-метр, паровой стерилизатор под давлением, электротермический инкубатор с постоянной температурой, аппарат для культивирования, инкубатор с CO2, водяную баню с постоянной температурой, инвертированный микроскоп, центрифугу. , стерильный фильтр, моющее устройство, доска для подсчета клеток и электронный прибор для технологии клеток и т. д., Автоматизированное оборудование для культивирования клеток cfam компании Shenyang GREAT ELITES Intelligent Equipment Co., Ltd. может реализовать удвоение культуры клеток, а уровень чистоты может достигать уровня чистоты GMP. Подходит для предприятий, которым необходимо большое количество культивируемых клеток. Культуру клеток можно разделить на первичную культуру клеток и культуру субкультуры клеток.
1.1 первичная культура клеток
Первичная культура клеток представляет собой процесс, при котором различные ткани тела животного извлекаются из организма, обрабатываются различными ферментами (обычно используется трипсин), хелатирующими агентами (обычно используется ЭДТА) или механическими методами, диспергируются в отдельные клетки и культивируются в подходящей среде, чтобы клетки могли выживать, расти и размножаться.
Тем не менее, в первичной культуре клеток также есть некоторые дефекты, такие как потенциальные экзогенные факторы, отсутствие предварительной проверки стандартизации и большие различия между партиями из-за влияния возраста донора и состояния здоровья. Поэтому использование стабильных пассажных клеток для культивирования этих вирусов вместо первичных клеток стало будущим направлением развития.
1.2 пересев клеточной культуры
В пересевах при успешном исходе первичной культуры, при удлинении времени культивирования и непрерывном делении клеток происходит контактное торможение за счет контакта между клетками, скорость роста замедляется или даже прекращается; С другой стороны, это также будет вредно для роста или отравления из-за недостаточного накопления питательных веществ и метаболитов. В это время необходимо разделить культуру на мелкие части и засеять их в другой культуральный сосуд (флакон) для культивирования. Этот процесс называется субкультурой или рекультурой. Для монослойной культуры идеальной стадией пересева являются 80% конфлюэнтных или вновь конфлюэнтных клеток. Субкультура клеточной культуры в производстве вакцин относится к процессу культивирования стабильных клеточных линий, отбору криоконсервированных клеточных линий, предназначенных для производства, и их культивированию после реанимации клеток.