Условия питания клеточной культуры
Условия питания клеточной культуры
1. Питательная среда
Среда для культивирования клеток содержит различные питательные вещества, необходимые для роста клеток, включая углеводы, аминокислоты, неорганические соли, витамины и т. д. В соответствии с потребностями различных клеток в питании можно выбрать различные синтетические среды, такие как ebss, eagle , MEM, rpmll640, DMEM и т. д.
2. Другие добавленные ингредиенты
В дополнение к основным питательным веществам, обеспечиваемым различными синтетическими средами, следует добавлять другие компоненты, такие как сыворотка и факторы, в соответствии с различными клетками и различными целями культивирования.
Сыворотка обеспечивает важные вещества, такие как внеклеточный матрикс, фактор роста и трансферрин, и обычно используется эмбриональная бычья сыворотка. Доля добавляемой сыворотки должна определяться в соответствии с различными клетками и различными исследовательскими целями. 10% ~ 20% сыворотки могут поддерживать быстрый рост и пролиферацию клеток, что называется ростовой средой; Для поддержания медленного роста или бессмертия клеток можно добавить 2–5% сыворотки, что называется поддерживающей культуральной средой. Однако в сыворотке также присутствуют вещества, вредные для роста и размножения клеток, такие как комплемент, иммуноглобулин и некоторые факторы, замедляющие рост; Состав не ясен, что влияет на анализ результатов; Активность сыворотки разных животных и разных партий различна, что влияет на стабильность культурального эффекта.
Глютамин является важным источником азота для роста клеток и играет важную роль в процессе роста и метаболизма клеток. Однако глютамин очень нестабилен в растворе и легко расщепляется. Он может разлагаться примерно на 50% через 7 дней при температуре 4 ℃, поэтому перед использованием необходимо добавить глютамин.
Для предотвращения контаминации в культуральную среду следует добавлять определенное количество антибиотиков.