Меры предосторожности для клеточных культур
Меры предосторожности для клеточных культур
(1) При культивировании определенной клетки в первый раз вы должны сначала найти название клетки, чтобы понять соответствующую информацию, включая культуральную среду, сыворотку, добавки, нормальное время переваривания, время пассажа и т. д. Для конкретных клеток (таких как как первичные культивируемые клетки), необходимо обратиться к соответствующей литературе, чтобы получить более точные методы культивирования.
(2) При вводе клетки в клеточную культуру необходимо строго соблюдать следующие шаги:
① Убедитесь, что все растворы и расходные материалы для работы с ячейками были без проблем продезинфицированы и протестированы. Не используйте неопределенные растворы и расходные материалы. Не заимствуйте чужие решения, за исключением особых обстоятельств.
② Убедитесь, что манжеты одежды закатаны или манжеты белого халата застегнуты.
③ Определите количество спирта в спиртовке и при необходимости пополните его.
④ Убедитесь, что все необходимые растворы и расходные материалы находятся в пределах досягаемости. Для того, чтобы открыть пробку одной рукой, перед экспериментом можно ослабить все пробки.
⑤ Старайтесь не наливать раствор напрямую, если горлышко бутылки не обожжено. Если заливка не удалась и раствор прилип к горлышку флакона, осторожно очистите периферию горлышка флакона бумажной салфеткой, смоченной 75% спиртом (не прикасайтесь к горлышку флакона), и сожгите его на пламя.
⑥ Если используемые расходные материалы не уверены в чистоте во время работы, их необходимо своевременно заменять.
⑦ Своевременно убирайтесь после эксперимента, держите рабочее место в чистоте и порядке и, наконец, протрите стол 75% спиртом.
(3) Предотвращение загрязнения клеток
① Лабораторные принадлежности предотвращают загрязнение. Реагенты, расходные материалы и оборудование, используемые для культивирования клеток, должны быть тщательно очищены и продезинфицированы, а стерилизация различных растворов должна быть осторожной и может быть использована только после отрицательного результата теста на стерильность. Операционная и оставшееся стерильное оборудование должны регулярно очищаться, дезинфицироваться и стерилизоваться.
② Предотвращайте загрязнение во время работы.
③ Одежду, которая легко создает статическое электричество или впитывает пыль, перед входом в камеру необходимо заменить белым халатом.
④ Перед началом эксперимента необходимо убедиться в отсутствии проблем с перчатками. Пока перчатки находятся в контакте с предметами за пределами бокса биобезопасности, их необходимо вовремя дезинфицировать.
⑤ Войдя в помещение для культивирования клеток, закройте дверь, садитесь и ходите как можно меньше, чтобы не повредить воздушную завесу бокса биобезопасности. Перед работой протрите руки и пробки от бутылок ватными дисками с 75%-ным спиртом. Заранее строго проверяйте оборудование, растворы и ячейки. Не вносите зараженные или нестерилизованные предметы в стерильную комнату, не говоря уже о том, чтобы использовать их небрежно, чтобы избежать крупномасштабного загрязнения.
⑥ Эксплуатация ячеек должна быть легкой. Горлышко бутылки должно быть открыто в стерильной зоне вокруг пламени, а горлышко бутылки должно быть помещено вокруг пламени для простого вращения и горения. Будьте осторожны, чтобы пламя не обожгло горлышко пластиковой бутылки.
⑦ Во время экспериментальной работы перегородка бокса биобезопасности должна быть как можно ниже, чтобы свести к минимуму разговоры. При чихании или кашле он не должен быть обращен к рабочей зоне, чтобы избежать ненужного загрязнения.
⑧ Крышка бутылки должна быть перевернута вверх дном от самой себя, чтобы предотвратить загрязнение крышки бутылки в результате неправильной эксплуатации.
⑨ Не проходите мимо открытого контейнера, чтобы избежать загрязнения ячейки неизвестными предметами, упавшими на одежду.
⑩ Во время экспериментальной эксплуатации обратите внимание на своевременную замену пипетки Пастера, головки пипетки и пипетки и не доводите одну трубку до конца. В случае контакта с нечистыми или неопределенными предметами их необходимо сразу выбросить. После эксперимента его необходимо вовремя убирать, чтобы лаборатория содержалась в чистоте и порядке. Наконец, столешница очищается 75% спиртом.
(4) Предотвратить перекрестное загрязнение клеток
① При проведении различных операций с культурами клеток используемые инструменты следует строго различать, а для идентификации их лучше маркировать. Операция выполняется последовательно, и за раз обрабатывается только одна ячейка. Когда несколько ячеек и несколько операций выполняются вместе, может возникнуть путаница.
② Во время замены жидкости или пассажа головка пипетки и пипетка, прикрепленная к клеткам, не должны касаться горлышка флакона с реагентом, чтобы клетки не попали в культуральную среду и не загрязнили другие клетки.
③ После того, как все клетки куплены, привезены из других мест или установлены сами по себе, их необходимо сохранить и заморозить во времени. В случае загрязнения клетки можно реанимировать и продолжить культивирование.