Что такое тип среды для культивирования клеток и как это сделать?
Культура животных клеток заключается в том, чтобы взять соответствующие ткани из тела животного, распределить их по отдельным клеткам (с помощью трипсина или коллагеназы), а затем поместить их в подходящую культуральную среду, чтобы позволить этим клеткам расти и размножаться.
Какие существуют типы сред для культивирования клеток?
Согласно истории развития сред для культивирования клеток, среды для культивирования клеток можно условно разделить на несколько типов, таких как сбалансированный солевой раствор, природные среды для культивирования клеток, синтетические среды для культивирования клеток, среды для культивирования клеток без сыворотки и среды для культивирования клеток с ограниченным содержанием. химические компоненты.
1. Среда для культивирования клеток DMEM
DMEM (модифицированная минимальная основная среда Дульбекко) получена Дульбекко на основе среды МЕМ. Количество каждого компонента удваивается и делится на два вида: с низким содержанием сахара (1000мг/л) и с высоким содержанием сахара (4500мг/л). Клетки быстро растут. Лучше использовать высокий уровень глюкозы для культивирования опухолевых клеток с плохой адгезией и клонов, и его часто используют для культивирования миеломных клеток гибридомы и трансформированных клеток, трансфицированных ДНК.
2. Нейрональная основная культуральная среда
Он может обеспечить основные питательные вещества для роста нейронов.
3. Среда для насекомых Ipl-41
Среда для насекомых Ipl-41 предназначена для крупномасштабного размножения клеточной линии Spodoptera frugiperda, а также обычно используется для экспрессии белка с помощью бакуловирусной системы экспрессии (BEVS). Среда Ipl-41 является усовершенствованием оригинальной формулы IPL. Он был разработан Weiss et al. Лаборатория патологии насекомых Министерства сельского хозяйства США. Его использовали для крупномасштабной экспансии клеточных линий, полученных из Spodoptera cowensis. Weiss добавила эмбриональную бычью сыворотку и среду TPB к основной среде и успешно реализовала крупномасштабное непрерывное культивирование клеточной линии ipl-21 AE (III).
Среда в основном используется для культивирования и поддержания клеточных линий, полученных из чешуекрылых, и амплификации вирусов этих клеточных линий. Среду Ipl-41 также использовали для экспрессии рекомбинантного белка бакуловируса в бессывороточных клетках Spodoptera.
1.1 сбалансированный солевой раствор (BSS)
BSS в основном состоит из неорганических солей и глюкозы. Его функция заключается в поддержании баланса осмотического давления клеток, поддержании стабильности pH и обеспечении простого питания. Он в основном используется для промывки клеток и приготовления других реагентов.
В настоящее время сыворотка, используемая для культивирования клеток, в основном представляет собой сыворотку крупного рогатого скота, а некоторые специальные клетки также культивируют с сывороткой человека и сывороткой лошади. Бычья сыворотка подходит для большинства клеток млекопитающих, но не исключено, что при культивировании определенных клеток более целесообразно использовать сыворотку других животных. Сыворотка содержит различные белки плазмы, полипептиды, жиры, углеводы, факторы роста, гормоны, неорганические вещества и т. д. Эти вещества обеспечивают физиологический баланс, стимулируя рост клеток или ингибируя ростовую активность.
1.2 синтетическая среда для культивирования клеток
Синтетическая питательная среда представляет собой разновидность питательной среды, которая синтезируется, искусственно конструируется и готовится из химических веществ в соответствии с составом натуральной питательной среды. Самая ранняя разработанная основная среда (MEM) представляет собой изотоническую смесь с рН-буфером, содержащую соль, аминокислоты, витамины и другие необходимые питательные вещества. На этой основе постоянно разрабатывались среды DMEM, IMDM, ham F12, prmi1640 и другие синтетические среды для культивирования клеток.